Masson三色染色由Mallory三色染色改造，利用两种或三种阴离子染料混合或一起先后作用完成染色，与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关。根据组织不同的渗透性能，选择分子大小不同的阴离子的染料进行染色，便可把不同组织成分显示出来。小分子量易穿透 结构致密、渗透性低的组织；大分子量则只能进入结构疏松、渗透性高的组织。然后，亮绿或苯胺蓝的分子量都很大，因此Masson染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈绿色或蓝色。

实验流程：

脱蜡至水-Bouin's固定液过夜-铁苏木素染色-丽春红酸性品红染色-磷钼酸处理-苯胺蓝复染-脱水封片-显微镜镜检。

样本要求及运输条件：

1、提供固定完全的组织样本。组织离体后，选择合适的固定液和容器立即固定，固定液的量建议大于组织体积的10-15倍，固定时间建议24-48h，大标本固定12h，再切开固定。固定完全后尽快送检。标本常温（24℃左右）或冷藏（4℃）固定，切勿冷冻结冰，固定样本常温运输送样。

2、涂片和爬片必须充分固定。

3、石蜡切片常温保存运输，冰冻切片-80℃保存干冰运输。

注意事项：

1、若组织用甲醛液固定，可在切片脱蜡至水后再置于Bouin'固定液于37℃烘箱内补充固定1-2小时，或常温固定一夜，流水冲洗10分钟，务必将固定液冲洗干净再进行后续染色。

2、Weiger铁苏木素分A、B两液，应于临用前将两液等份混合使用，而不宜预先混合，否则容易氧化沉淀而逐渐失去染色力。

3、磷钼酸处理时应镜下控制，见肌纤维呈红色，胶原纤维呈淡红色即可。

4、部分组织95%酒精脱水容易造成脱色过度，应注意肉眼控制。